[1]郑州大学人民医院/河南省人民医院肿瘤内科, 450003
[2]复旦大学肝癌研究所/中山医院/教育部癌变与侵袭原理重点实验室
目的:探讨甘露糖敏感性绿脓杆菌制剂(PA-MSHA)对水浴加热后有转移潜能的人肝癌MHCC97L细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制。方法:42℃水浴加热前2h加入1×10^11/L PA-MSHA,加热组不加药,对照组不加热、不加药,其他处理相同并在同一时间点观察。在不同的时间观察细胞增殖、生长曲线、克隆形成率、流式细胞术分析细胞周期(FCM)、侵袭、运动、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达。结果:PA-MSHA能够逆转加热对人肝癌MHCC97L细胞的增殖促进作用,和对照组比较,加热联合PA-MSHA能明显抑制人肝癌MHCC97L细胞的增殖(P<0.01),其最大抑制效应为加热后48h(42.3%),细胞倍增时间延长了1.68倍,加热联合PA-MSHA组其加热后48、96h的细胞集落形成率均明显降低(P<0.01),FCM显示,加热联合PA-MSHA能逆转加热对细胞周期的影响,和对照组比较,其48h的G1期细胞比例明显升高,S+G2期细胞比例明显降低(P<0.01),其96h的G1期和S+G2期细胞比例差异无统计学意义(P<0.05)。加热联合PA-MSHA组其加热后48h和96h相同数量的细胞穿过人工基底膜到达Transwell小室膜背面的细胞平均数(侵袭实验)和穿过Transwell小室膜到达背面的MHCC97L细胞平均数(运动实验)均明显低于加热组(P<0.01),ELISA法检测相同数量细胞的上清液发现,加热联合PA-MSHA组其加热后48、96h细胞VEGF和MMP-2蛋白的分泌量和加热组比较差异无统计学意义(P<0.05)。结论:PA-MSHA能抑制体外加热后肝癌细胞的增殖,其作用和抑制细胞进入DNA合成期和分裂期有关,进一步抑制其侵袭运动能力,其作用和MMP-2、VEGF表达无关。
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