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基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株期刊论文

编号：

13ffeb36-ef2e-4c70-862e-290543604aac
作者：

涂文辉#侯伟;张瑾;吕莹;王瑾瑜张咏梅张轶俊刘红艳朱浩翔秦艳丽毛日成张继明
地址：

[1]上海复旦大学附属华山医院感染科, 200040
[2]浙江省台州市立医院感染科
[3]浙江省台州市立医院检验科
[4]复旦大学附属公共卫生临床中心
语种：

中文
期刊：

肝脏 ISSN：1008-1704 2013 年 5 期 (297 - 302)
收录：
关键词：

乙型肝炎病毒单标记探针熔解曲线分析前C区变异定量检测
摘要：

目的:建立一种HBV复杂前C区变异株精确定量的检测系统。方法:分两步实时PCR完成检测。首先应用野生株阻断探针(WT-blocker probe)进行选择性抑制野生株病毒的扩增,而含量偏低的变异株病毒得以扩增约10000倍,使其在后续反应中易于检出;第二步应用单标记探针(SimpleProbe)结合熔解曲线分析系统精确定量检测前C区G1896A、G1899A、G1896A/G1899A变异株。通过PBPPO(primer-blocker-probe partial-overlap)设计减少基因多态性对检测的影响,来提高检测精确度。检验结果经直接测序及聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析方法予以证实。结果:4种标准质粒(G1896/G1899、G1896A、G1899A、G1896A/G1899A)能够很好地被检出并予以区分,突变检测灵敏度达到0.01%;10例HBeAg阳性(直接测序法鉴定前c区变异阴性)患者血清标本中,每例至少1种前C区变异株被检出。结论:单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析能够早期灵敏检测前C区变异株,前C区变异株进化过程及机制还需进一步大样本、纵向队列研究予以阐明。
推荐引用方式
GB/T 7714：

涂文辉(1),侯伟(2),张瑾(3), 等. 基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株 [J].肝脏,2013(5):297-302.
APA：

涂文辉(1),侯伟(2),张瑾(3),吕莹(4),&张继明(1).(2013).基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株 .肝脏(5):297-302.
MLA：

涂文辉(1), et al. "基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株" .肝脏,5(2013):297-302.

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基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株 期刊论文

基于单标记探针实时荧光定量PCR和熔解曲线分析方法定量检测HBeAg阳性患者前C区变异株期刊论文