目的 RNA干扰是由双链RNA引发的转录后基因沉默.为了研究表皮生长因子受体对食管癌细胞的作用,文中构建针对人HER4基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,转染人食管癌细胞Eca-109,观察其基因沉默效果,探索食管癌基因治疗的新途径.方法 根据siRNA设计原则,设计针对HER4基因的两条寡核苷酸链,退火后与载体SUPER.neo+gfp连接,然后进行酶切鉴定和DNA序列测定.用脂质体包裹转染食管癌细胞Eca-109,用荧光定量PCR和Western blot方法检测HER4蛋白表达情况.结果 经酶切鉴定和DNA测序分析后,提示HER4靶向RNA干扰重组载体构建成功.转染食管癌细胞后,用荧光定量PCR和Western blot法检测HER4基因表达水平显著降低.结论 成功地构建了针对人HER4基因的siRNA表达载体,并可有效抑制食管癌细胞Eca-109中该基因的表达.
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