[1]复旦大学上海医学院法医学系,上海200032
[2]上海市公安局物证鉴定中心/上海市现场物证重点实验室,上海200043
[3]复旦大学附属儿科医院儿童发育与疾病转化医学研究中心,上海 201102
目的:探讨实时RT-PCR方法常用内对照表达水平在死亡早期人体心肌组织中的稳定性。方法:选取10例具有一致的外界环境(平均存放温度25℃)、不同死亡时间(4.3-22.3h)的个体,提取心肌组织的总RNA。选择6个常用内对照:β-actin、GAPDH、B2M、U6、18S rRNA、HSA-miR-1,通过实时RT-PCR检测其在心肌组织的表达水平。利用genormPLUS软件评估内对照在死亡早期表达水平的稳定性,挑选出最稳定的内对照并且分析其表达水平与相关因素(年龄、性别、死因)的关系。结果:死亡早期心肌组织中U6表达水平最稳定,其表达量与年龄、性别及死因无关(P>0.05)。结论:U6可以作为实时RT-PCR方法研究死亡时间与心肌组织中核酸降解之间规律的理想内对照。