目的:明确异烟肼和利福平联合用药对健康成人原代肝细胞CYP450同工酶1A2和3A4活性的影响。方法:从健康成人肝脏或肝叶中分离出肝细胞,分为CYP450同工酶1A2和3A4两部分,各分为阴性对照组及药物处理组共15组,放入24孔细胞培养板内,每组6个复孔,原代培养3d,阴性对照组加入等量的细胞培养液,各药物处理组对应加入临床血药峰浓度范围内的异烟肼(25μmol/L,50μmol/L)、利福平(12.5μmol/L,25μmol/L)或两药联用(CYP1A2:利福平12.5μmol/L加异烟肼50μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼50μmol/L;CYP3A4:利福平12.5μmol/L加异烟肼25μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼25μmol/L,利福平25μmol/L加异烟肼50μmol/L),孵育2d,再加入CYP450同工酶1A2和3A4的相应底物(非那西丁和睾酮),反应终止后用高效液相仪测量代谢产物(对乙酰氨基酚与6β-羟基睾酮)的峰面积(单位:mAU·min)代表1A2和3A4的活性。结果:(1)单用25μmol/L和50μmol/L浓度异烟肼肝细胞CYP450同工酶1A2的活性分别是(3.33±0.65)、(3.03±0.38)mAU·min,与阴性对照组的(5.23±0.31)mAU·min比较差异均有统计学意义(P均<0.01);单用12.5μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶1A2的活性为(6.07±0.55)mAU·min,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),单用25μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶1A2的活性为(4.93±0.57)mAU·min,与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);异烟肼和利福平2种浓度联合配伍,肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别是(3.27±0.96)、(3.97±0.25)mAU·min,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。(2)单用25μmol/L和50μmol/L浓度异烟肼肝细胞CYP450同工酶1A2的活性分别是(5.40±1.35)、(2.63±0.06)mAU·min,与阴性对照组的(12.53±0.51)mAU·min比较差异均有统计学意义(P均<0.01);单用12.5和25μmol/L浓度利福平肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别为(165.17±11.47)、(120.20±15.73)mAU·min,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);异烟肼和利福平3种浓度联合配伍,肝细胞CYP450同工酶3A4的活性分别是(118.37±8.90)、(77.53±6.91)、(68.73±4.72)mAU·min,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01),但低于相应浓度单用利福平组(P<0.05或0.01)。结论:临床血药峰浓度范围的异烟肼与利福平单用或联用对CYP450同工酶1A2活性影响未达到抑制或诱导水平。临床血药峰浓度范围的异烟肼抑制CYP450同工酶3A4的活性,利福平诱导CYP450同工酶3A4的活性,两药联合仍呈诱导作用。
(8.0+极速模式)