第一部分抗CD25单抗诱导治疗对肾移植早期患者外周血调节性T细胞及其亚群的影响目的本部分拟研究肾移植早期患者接受抗CD-25单克隆抗体诱导治疗后对其外周血调节性T细胞(Treg)及其亚群的影响。方法自2012至2013年间,10名肾移植患者根据是否接受巴利昔单抗诱导治疗,被分为诱导组和非诱导组,分别在肾移植术前两小时、术后1周、术后2周采集外周血液样本,使用流式细胞仪分析其调节性T细胞及其亚群的比例。结果与非诱导组相比,巴利昔单抗诱导组外周血中CD25+T细胞和CD25+Foxp3+双标记T细胞均出现明显的下降,并在术后两周内保持较低水平。活化型Treg与分泌细胞因子型Treg亚群也在术后1周内出现了短暂的下降。抑制性转录因子FOXP3并没有在接受诱导治疗后受到显著影响。结论在肾移植早期阶段,抗CD25单克隆抗体下调外周血调节性T细胞及其活化亚群的比例,但其免疫抑制功能未受到明显影响。第二部分体外分离培养调节性T细胞后,抗CD25单抗对其生存和功能的影响目的本部分拟在体外分离培养健康志愿者外周血PBMC调节性T细胞,研究抗CD25单抗对其生存和免疫抑制功能的影响。方法分离健康志愿者外周血PBMC,采用流式分选方法分选CD4+CD25+CD 127-调节性T细胞,加入刺激因子与之共培养扩增,使用抗CD25单克隆抗体处理后,使用AnnexinV/PI双染法检测其凋亡情况,使用ELISA方法检测其IL-10, TGF-β等细胞因子的分泌情况。结果与对照组相比,抗CD25单抗处理组在细胞凋亡、细胞因子分泌等方面未出现明显差异。结论在体外实验中,使用抗CD25单克隆抗体后,调节性T细胞的生存及其免疫抑制因子的分泌功能并未受到明显影响。
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