目的:构建仿生肝脏三维空间血管网络,探讨这一组织工程实质脏器三维血管网络构建新方法的可行性。方法:利用64排计算机断层扫描(CT)采集正常人肝脏血管并转换成4cm×4cm血管断层平面坐标图,根据血管不同断面平面坐标图进行激光打孔处理。扫描电子显微镜(SEM)检测打孔后,膜片变化。将打孔后的各膜片按次序通过基质胶粘贴在一起。以绿色荧光蛋白(GFP)一腺病毒标记骨髓干细胞诱导的内皮细胞,将标记的内皮细胞灌注于仿生血管网络中。放入37℃、5%CO2培养箱培养,在培养的第3周检测血管形成状况。结果:GFP一腺病毒按照感染复数(MOI)=0、5、25、50、100转染间充质干细胞(MSCs)1周后,MOI=100阳性标记率最高[(82.13±3.65)%],细胞增殖实验显示5组间细胞增殖率差异无统计学意义(P>0.05)。内皮细胞迁移实验6h后,5组细胞迁移数分别为(32.54±1.14)、(28.13±1.43)、(28.89±1.01)、(27.28±0.52)、(33.14±0.98)个、视野,差异无统计学意义(P>0.05)。激光打孔后,扫描电镜观察孔径边缘,孔径边缘光滑平整。经3周后免疫荧光检测,可见管壁形成内皮细胞层。结论:针对组织工程脏器血管网络的构建,将为今后组织工程脏器构建奠定研究基础。
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