[1]兰州大学结核病研究中心暨病原生物学研究所,730000
[2]兰州生物制品研究所
[3]复旦大学遗传学研究所
[4]Department ofMolecular Microbiology and Immunology, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
目的:探讨二甲基三十六烷基铵(DDA)、卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)作为结核病融合蛋白疫苗佐剂的免疫效应。方法:采用热酚法制备BCG-PSN,与DDA联合作为融合蛋白AMM(Ag85B-MPT64 190-196-Mtb8.4)佐剂免疫小鼠,设卡介苗、生理盐水、弗氏不完全佐剂(IFA)及单独应用DDA或BCG-PSN一种佐剂的各组作为对照。应用ELISA和酶联免疫斑点法检测免疫小鼠的体液与细胞免疫反应。结果:分离培养疫苗免疫小鼠的脾脏淋巴细胞,用特异性抗原Ag85B刺激后,AMM+DDA+BCG-PSN疫苗组、AMM+DDA组和卡介苗组小鼠每1×10^6个脾淋巴细胞分泌γ-干扰素的细胞数分别为222±79、259±85和230±64,均明显高于AMM+PBS组(40±4)、AMM+IFA组(10±3)、AMM+BCG.PSN组(132±18)和生理盐水组(8±4),差异有统计学意义(t值为2.923—7.118,均P<0.05);与单用DDA组比较,添加DDA和BCG-PSN两种佐剂的疫苗组小鼠血清抗体滴度Ig2/IgG,较高(0.125和0.025),但γ-干扰素分泌水平没有增高。结论:AMM+DDA+BCG-PSN结核病亚单位疫苗能够引起较强的Th1细胞免疫为主的免疫反应,DDA+BCG-PSN(尤其是DDA)具有增强结核病亚单位疫苗Th1细胞免疫应答的佐剂效应。
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