[1]复旦大学附属中山医院神经内科,上海 200032
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(peroxisome prolfferator-activated receptor-γcoactivator,PGC)-1α在海人酸(kainicacid,KA)诱导的培养大鼠海马神经元氧化应激及神经损伤中的作用。方法:离体培养大鼠海马神经元,采用电穿孔基因转染技术分别转染PGC-1αshRNA质粒和空载体质粒。培养7天后,用KA刺激上述海马神经元24h,检测转染空载体质粒海马神经元(空白对照组,n=10)、KA刺激的转染PGC-1αshRNA质粒(实验组,n=11)和KA刺激的空载体质粒海马神经元(KA对照组,n=10)的谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxidase dismutase,SOD)和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)活性变化。FJB染色检测KA刺激24h后实验组和KA对照组培养大鼠海马神经元神经损伤情况。结果:KA刺激24h,培养的大鼠海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(5.74±0.54)μmol·L^-1·μg^-1protein和(10.57±1.25)U/mgprotein,较空白对照组显著降低[(9.38±0.72)μmol·L^-1·μg^-1。protein,P<0.01;(23.12±3.23)U/mgprotein,P<0.01];LDH活性为(2.21±0.18)mmotNADH,H^+/min/100mgprotein,较空白对照组海马神经元显著增高[(1.29±0.09)mmolNADH,H^+/min/100mgprotein,P<0.01]。转染PGC-1qshRNA质粒组,KA刺激24h海马神经元GSH含量和SOD活性分别为(3.37±0.42)/μmol·L^-1·g^-1 protein和(4.54±0.91)U/mgprotein,较KA对照组海马神经元明显降低(P均<0.05);LDH活性为(2.74±0.19)mol/NADH^+/min/mgprotein,较KA对照组海马神经元显著增加(P<0.01)。FJB染色显示转染PGC-1nshRNA质粒组,KA刺激24h培养大鼠海马神经元损伤较KA对照组明显增加(P<0.05)。结论:PGC1口基因下调加重KA刺激后培养大鼠海马神经元损伤,可能与其加重氧化应激损伤有关。
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