目的:观察腺病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因对雄激素非依赖前列腺癌细胞的杀伤作用,探讨雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)基因治疗的可行性。方法:制备携带HSV-TK的重组腺病毒载体(AdTK),AIPC细胞PC-3细胞加入AdLacZ,滴度(MOI)分别为50、100、150、200、250.48h后计算各滴度AdLacZ转染PC-3细胞的细胞感染率(%)。转染后使用更昔洛韦(GCV)处理,浓度为10mg/L,噻唑蓝(MTT)比色法观察AdTK/GCV对PC-3细胞的体外杀伤效应。结合电镜技术、流式细胞仪检测探讨AdTK/GCV对PC-3细胞的杀伤机制。结果:对体外培养的PC-3细胞杀伤实验表明,随着AdTKMOI增加及GCV剂量增加,细胞存活率逐渐降低。AdTKMOI为150和250时,GCV的半数致死量(IC50)分别为7.75mg/L和5.00mg/L。电镜和流式细胞仪检测证实细胞死亡有细胞凋亡机制参与。AdTK/GCV处理后非转染PC-3细胞出现死亡,存在旁观者效应,效应强弱与AdTK转染、未转染细胞混合比例相关。结论:AdTK/GCV能有效杀伤雄激素非依赖前列腺癌PC-3细胞。
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